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液相色谱等度系统的改善分离条件

点击次数:868 发布时间:2022-05-09
  液相色谱等度系统的改善分离条件:
  在液相色谱等度系统定量分析中,分离开是首要要求。基线分离是提供结果的保障。
  含有5个组分或更少的样品,使谱峰之间达到基线分离(R>1.5)一般较为容易。分离度会随色谱柱的使用时间逐步降低,也会由于分离条件的微小波动而在不同时间有所变化,因此在建立简单混合物的分离方法时,使R≥2。这样的分离度将有利于改善测试晶度和方法的普适性;含10团种或10种以上组分的样品,分离一般会困难,目标分离度往往必须降低至R>1.0—1.5。
  有些HPLC测定不必使部被测组分达到基线分离,这种情况zui常见于所测样品中可能存在数种化合物但仅需检测其中的一种时。比如在普查水或土壤样品中的某污染物(如定性分析不同的除芳剂)时,仅需要分离出个别除莠剂,确定其特征保留时间进行峰鉴别即可。
  尽管大多数HPLC设备能在更的压力下工作,使用色谱柱的工作压力不应过170bar(2500psi,17MPa),压力上限在2000psi以下。
  限制该压力基于两点原因:*、随着色谱柱的使用,微粒杂质会逐步堵塞柱头,使柱压成倍升;第二、较低的压力(<170bar)适于泵、进样阀、尤其是自动进样装置的稳定工作,密封垫的寿命更长,色谱柱堵塞的情况减少,系统的耐久性明显提。因此,以小于泵的zui大允许压力的50%作为目标压力。

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