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C18液相色谱柱的使用及维护事项

点击次数:543 发布时间:2022-07-07
C18液相色谱柱是一种常用的反相色谱柱, 它以十八烷基硅烷键合硅胶为填料,因此有较高的碳含量和更好的疏水性,对各种类型的生物大分子有更强的适应能力,适用范围较广

C18液相色谱柱的使用注意事项及维护:

1.柱子在装卸、更换时,动作要轻,接头拧紧要适度。必须防止较强的机械振动,以免柱床产生空隙。

2.如果仪器用来做常规分析,样品种类有限,但分析次数多,则不妨为每一类常规分析配置1根专用柱,这样有助于延长柱子的寿命。

3.如使用柱温控制装置时,应注意在通入流动相后才能升温。

4.流动相使用前需进行脱气处理,以免降低柱效和影响检测等。样品溶液需经适当的前处理及过滤,以减少柱污染和堵塞。

5.在更换流动相种类时,应注意溶剂的互溶性,防止发生盐析现象。

6.柱子的实际操作压力应低于填装时的*高压力,尽量*高压力一半以下。

7.流动相的pH值应严格控制在2~7之间,以免损坏柱子。

8.在完成分离分析工作之后,不应马上停机,需及时对色谱分析系统进行冲洗,一般0.5 h以上,以除去色谱柱内的杂质。

9.如果流动相中有盐类,首先用水充分清洗。如果是胺类添加到流动相中,要用50%甲醇和0.05%磷酸溶液混合溶剂冲洗,不要只用水冲洗。

10.选用合适的C18液相色谱柱,以保护分析柱免受杂质颗粒及不可逆吸附的干扰物的影响。保护柱内装填料颗粒度应与分析柱填料的颗粒度尽量一致。

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